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          圖像流式細胞儀主要由四個部分組成

          發(fā)布時間: 2021-06-26  點擊次數(shù): 1080次
            圖像流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預選的參量范圍把細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節(jié) 分辨率為零。
           
            本儀器主要由四部分組成。分別是流動室和液流系統(tǒng);激光源和光學系統(tǒng);光電管和檢測系統(tǒng);計算機和分析系統(tǒng)。
            1、流動室和液流系統(tǒng):流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設計和制作均很精細,是液流系統(tǒng)的心臟。樣品管貯放樣品,單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出;鞘液由鞘液管從四周流向噴孔,包圍在樣品外周后從噴嘴射出。
           
            2、激光源和光學系統(tǒng):經(jīng)特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據(jù)被激發(fā)物質的激發(fā)光譜而定。
           
            3、光電管和檢測系統(tǒng):經(jīng)熒光染色的細胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量的。光電倍增管(PMT)最為常用。PMT的響應時間短,僅為ns數(shù)量級;光譜響應特性好,在200~900nm的光譜區(qū),光量子產(chǎn)額都比較高。光電倍增管的增益從10到10可連續(xù)調節(jié),因此對弱光測量十分有利。光電管運行時特別要注意穩(wěn)定性問題,工作電壓要十分穩(wěn)定,工作電流及功率不能太大。
           
            4、計算機和分析系統(tǒng):經(jīng)放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應的,也是和光信號的強弱相關的。對應道數(shù)年縱坐標通常代表發(fā)出該信號的細胞相對數(shù)目。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉換器輸往微機處理器編成數(shù)據(jù)文件,或存貯于計算機的硬盤和軟盤上,或存于儀器內以備調用。計算機的存貯容量較大,可存貯同一細胞的6~8個參數(shù)。
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